目擊者口供不可以定罪。刑事訴訟法規定：只有被告人供述，沒有其他證據的，不能認定被告人有罪和處以刑罰;沒有被告人供述，證據確實、充分的，可以認定被告人有罪和處以刑罰。
定罪是以犯罪構成為根據的，因而定罪是一個罪體與罪責相結合的過程。定罪原則，就是定罪活動中應當遵循的規則，這就是主觀與客觀相統一的原則。這裡的主觀與客觀是指對犯罪的評判標準。主觀，指主觀標準，以此作為唯一評價標準的就是主觀主義。客觀，指客觀標準，以此作為唯一評價標準的就是客觀主義。主觀與客觀相統一，是指在犯罪評價上採取主觀與客觀的雙重標準。定罪的條件：
條件一：法律規定的權益受到他人的非法侵害。
條件二：存在著有一個危害性的行為。
條件三：要有一個實施犯罪的主體。
條件四：行為人在主觀上是存在有過錯的。
法律依據：
《中華人民共和國刑事訴訟法》第五十五條
對一切案件的判處都要重證據，重調查研究，不輕信口供。只有被告人供述，沒有其他證據的，不能認定被告人有罪和處以刑罰;沒有被告人供述，證據確實、充分的，可以認定被告人有罪和處以刑罰。
證據確實、充分，應當符合以下條件：
(一)定罪量刑的事實都有證據證明;
(二)據以定案的證據均經法定程式查證屬實;
(三)綜合全案證據，對所認定事實已排除合理懷疑。
